Plásmido Doble Nickase (m) RGS17: sc-425225-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RGS17 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RGS17 (m) y el plásmido de doble nickasa RGS17 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rgs17. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RGS17 | sc-425225-NIC | 20 µg | $410.00 |
Rgs17 codifica el regulador de la señalización de proteínas G 17 (RGS17), una GAP que acelera la hidrólisis de GTP en las subunidades Gα activadas para terminar la señalización mediada por GPCR. En células de ratón, RGS17 modula la dinámica de los segundos mensajeros, incluidas las vías de cAMP/PKA y la señalización dependiente de calcio, configurando respuestas transcripcionales y metabólicas aguas abajo. Al ajustar la amplitud y la duración de las vías de GPCR, puede influir en la señalización neuronal, los procesos secretorios y redes más amplias de integración de señales. La actividad desregulada de RGS17 se ha vinculado en la literatura a contextos de señalización alterada de proliferación y supervivencia, lo que la convierte en un nodo útil para analizar fenotipos impulsados por GPCR en modelos relevantes para enfermedad.
RGS17 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rgs17 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rgs17. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rgs17. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rgs17 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.