RGS17 Plasmide Double Nickase (h): sc-416360-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RGS17 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RGS17 Double Nickase Plasmid (h) e il RGS17 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RGS17. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RGS17 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416360-NIC | 20 µg | $410.00 |
RGS17 (regolatore della segnalazione delle proteine G 17) è un membro della famiglia RGS che accelera l’idrolisi del GTP sulle subunità Gα attivate, attenuando così la segnalazione a valle dei recettori accoppiati a proteine G (GPCR). Limitando le vie dei secondi messaggeri guidate dai GPCR, inclusi cAMP/PKA e i relativi output collegati alle MAPK, RGS17 contribuisce a definire l’ampiezza e la durata delle risposte evocate dai recettori che influenzano proliferazione, migrazione e segnalazione da stress. Un’espressione deregolata di RGS17 è stata associata ad alterazioni della segnalazione oncogenica e del comportamento delle cellule tumorali in diversi contesti di cancro, ed è rilevante anche negli studi delle vie neuronali e neuropsichiatriche in cui la segnalazione GPCR è predominante. Di conseguenza, RGS17 è spesso studiato come modulatore molecolare delle reti di trasduzione del segnale e di fenotipi dipendenti dal contesto in modelli cellulari umani.
RGS17 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RGS17 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RGS17. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RGS17. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RGS17 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.