RGC32 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404843

Descripción general

RGCC codifica RGC32 (gen de respuesta al complemento 32), una proteína asociada al ciclo celular inducida por la activación del complemento y por diversas señales de estrés. RGC32 participa en la regulación de la transición G2/M y de la proliferación al modular la señalización dependiente de ciclinas e interactuar con vías de quinasas implicadas en el control de los puntos de control. También se ha relacionado con la biología inflamatoria y vascular mediante efectos sobre la activación y migración de células endoteliales y del músculo liso, así como sobre la remodelación de la matriz extracelular. Se ha descrito una expresión desregulada de RGC32 en múltiples contextos patológicos, incluida la proliferación asociada a tumores y la remodelación tisular relacionada con la fibrosis, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para estudiar el control del crecimiento y las respuestas al microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RGC32 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RGCC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RGCC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RGCC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RGC32.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RGCC para la investigación de la señalización de RGC32, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RGCC críticos para la función de RGC32
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RGCC para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RGC32 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RGC32 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RGCC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RGC32 (h) y el plásmido HDR RGC32 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RGCC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RGCC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.