Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
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RelB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422643
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RelB El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RelB, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RelB Anticuerpo (D-4): sc-48366
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RelB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422643 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Relb codifica RelB, un miembro de la familia NF-κB/Rel que actúa predominantemente en la vía no canónica de NF-κB. RelB suele formar heterodímeros con p52 (NFKB2) para regular programas de transcripción que controlan la maduración de las células dendríticas, la organogénesis linfoide, la supervivencia de las células B y la señalización inflamatoria aguas abajo de receptores como BAFFR, CD40 y LTβR. En sistemas murinos, la actividad de RelB conecta la comunicación cruzada entre la inmunidad innata y adaptativa al modular la expresión de citocinas y quimiocinas e influir en la presentación de antígenos. La desregulación de la señalización dependiente de RelB se asocia con una activación inmunitaria aberrante y un desarrollo inmunitario deficiente, lo que convierte a Relb en una diana útil para estudios mecanísticos de redes inflamatorias y diferenciación de células inmunitarias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RelB (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Relb en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Relb junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Relb tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RelB.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Relb para la investigación de la señalización de RelB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Relb críticos para la función de RelB
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Relb para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RelB CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RelB CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Relb. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RelB (m) y el plásmido HDR RelB (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Relb para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Relb definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.