Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417299
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Relaxin Receptor 1 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Relaxin Receptor 1-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Relaxin Receptor 1: sc-293228
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-417299 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
RXFP1 kodiert den Relaxinrezeptor 1, einen GPCR, der Peptide der Relaxin-Familie bindet und dadurch cAMP/PKA- und MAPK-Signalwege, die Produktion von Stickstoffmonoxid sowie Transkriptionsprogramme reguliert, die den Umbau der extrazellulären Matrix beeinflussen. In Fibroblasten, glatten Muskelzellen und Gefäßzellen moduliert die RXFP1-Aktivität Zellmigration, Adhäsion und Matrixumsatz durch Crosstalk mit TGF-β/SMAD- und integrinverknüpften Signalwegen. Veränderte RXFP1-Signalgebung wurde mit fehlregulierten fibrotischen Reaktionen und der Homöostase des Bindegewebes in Zusammenhang gebracht und ist daher relevant für Studien zur Organfibrose, Gefäßbiologie und Physiologie des Reproduktionstrakts. Als Oberflächenrezeptor mit kontextabhängiger Signalisierungsbias wird RXFP1 zudem genutzt, um GPCR-Desensibilisierung, Internalisierung und die Kopplung nachgeschalteter Effektoren zu untersuchen.
Das Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RXFP1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RXFP1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RXFP1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Relaxin Receptor 1-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RXFP1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Relaxin Receptor 1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf RXFP1-Exone abzielen, die für die Relaxin Receptor 1-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere RXFP1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Relaxin Receptor 1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RXFP1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Relaxin Receptor 1 HDR-Plasmid (h) und Relaxin Receptor 1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RXFP1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RXFP1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.