Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) RecQL4: sc-429775-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RecQL4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RecQL4 (m) y el plásmido de doble nickasa RecQL4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Recql4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RecQL4 Anticuerpo (B-3): sc-518189
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RecQL4 | sc-429775-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Recql4 de ratón codifica la helicasa RecQL4, un miembro de la familia RecQ que contribuye al mantenimiento del genoma durante la replicación y la reparación del ADN. RecQL4 participa en la activación de los orígenes de replicación y en la resección de extremos de ADN, y contribuye a vías como la recombinación homóloga, la unión de extremos no homólogos y la reparación por escisión de bases, limitando el estrés replicativo y la inestabilidad cromosómica. La pérdida o disfunción de RECQL4 se asocia con síndromes hereditarios de inestabilidad genómica y fenotipos de predisposición al cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la señalización del daño en el ADN, el control de los puntos de control y la reparación de roturas asociadas a la replicación. La perturbación de Recql4 se utiliza comúnmente para investigar cómo el reinicio de la horquilla impulsado por helicasas y la elección de la vía de reparación influyen en el destino celular bajo estrés genotóxico.
RecQL4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Recql4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Recql4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Recql4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Recql4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.