Partículas Lentivirales de Activación (h) RCC1: sc-402078-LAC

El gen humano **RCC1** codifica el **Regulador de la condensación cromosómica 1**, un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) unido a la cromatina para **Ran**, que establece el gradiente de **RanGTP** necesario para el transporte nucleocitoplasmático. Al acoplarse a la cromatina durante la mitosis, RCC1 favorece el ensamblaje del huso, la reconstitución de la envoltura nuclear y la segregación fiel de los cromosomas, vinculándose así con procesos centrales de la progresión del ciclo celular y la estabilidad del genoma. La actividad de RCC1 se intersecta con vías que regulan el control del punto de control mitótico y las respuestas al daño del ADN a través de sus efectos sobre el tráfico nuclear y la dinámica mitótica. La expresión o función desregulada de RCC1 se ha asociado con fenotipos proliferativos e inestabilidad cromosómica observados en múltiples contextos de cáncer, lo que lo convierte en un nodo relevante para estudios mecanísticos de la división celular y el transporte nuclear.

Las partículas de activación lentiviral RCC1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de RCC1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral RCC1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción RCC1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de RCC1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo RCC1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.