Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) RCC1: sc-402078-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RCC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RCC1 (h) y el plásmido de doble nickasa RCC1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RCC1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RCC1 Anticuerpo (E-6): sc-55559
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RCC1 | sc-402078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RCC1 | sc-402078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RCC1 codifica el regulador de la condensación cromosómica 1, un factor de intercambio de nucleótidos de guanina unido a la cromatina que activa a Ran al promover el intercambio de GDP por GTP. El gradiente resultante de RanGTP coordina el transporte nucleocitoplasmático, el ensamblaje del huso y la reconstitución de la envoltura nuclear, vinculando a RCC1 con la progresión del ciclo celular y la estabilidad del genoma. La función de RCC1 se integra con el control del punto de control mitótico y la dinámica de la cromatina, y su alteración puede modificar la segregación cromosómica y las respuestas al daño del ADN. La desregulación de la señalización RCC1–Ran se ha asociado con fenotipos proliferativos y se estudia con frecuencia en el contexto de la biología del cáncer y las vías de estrés mitótico.
RCC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RCC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RCC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RCC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RCC1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.