Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RCC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402078-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RCC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RCC1 Double Nickase Plasmid (h) e il RCC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RCC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RCC1 Antibody (E-6): sc-55559
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RCC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RCC1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RCC1 codifica il regolatore della condensazione dei cromosomi 1, un fattore di scambio di nucleotidi della guanina legato alla cromatina che attiva Ran promuovendo lo scambio da GDP a GTP. Il gradiente di RanGTP risultante coordina il trasporto nucleocitoplasmatico, l’assemblaggio del fuso mitotico e la riformazione dell’involucro nucleare, collegando RCC1 alla progressione del ciclo cellulare e alla stabilità del genoma. La funzione di RCC1 è integrata con il controllo del checkpoint mitotico e con la dinamica della cromatina, e la sua alterazione può modificare la segregazione cromosomica e le risposte al danno al DNA. Una deregolazione della segnalazione RCC1–Ran è stata associata a fenotipi proliferativi ed è spesso studiata nel contesto della biologia dei tumori e delle vie di risposta allo stress mitotico.
RCC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RCC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RCC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RCC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RCC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.