RBM24 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410387

Descripción general

RBM24 (proteína 24 con motivo de unión a ARN) es una proteína de unión a ARN enriquecida en músculo que regula la expresión génica postranscripcional controlando el empalme alternativo, la estabilidad del ARNm y la localización de los transcritos. Contribuye a la diferenciación miogénica y a la organización del sarcómero mediante la coordinación de programas de ARN específicos del músculo y la interacción funcional con la maquinaria de empalme y de traducción. La actividad de RBM24 se ha vinculado al desarrollo del músculo cardíaco y esquelético, y la alteración del procesamiento de ARN dependiente de RBM24 se asocia con fenotipos relacionados con cardiomiopatías y estados de diferenciación desregulados. Debido a que RBM24 modula la elección de isoformas y el destino del ARN, se estudia con frecuencia en vías que gobiernan el ensamblaje del citoesqueleto, el acoplamiento excitación–contracción y la remodelación sensible al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBM24 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBM24 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBM24 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBM24 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBM24.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBM24 para la investigación de la señalización de RBM24, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RBM24 críticos para la función de RBM24
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBM24 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBM24 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RBM24 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBM24. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBM24 (h) y el plásmido HDR RBM24 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBM24 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBM24 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.