RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432890

概要

Rbm15は、転写後の遺伝子発現制御に関与するRNA結合タンパク質RBM15をコードしており、選択的スプライシング、mRNAの核外輸送、安定性制御などに関与します。RBM15はm6Aライター関連複合体との相互作用を介してエピトランスクリプトーム制御にも関与し、細胞状態の遷移や系譜特異的な遺伝子発現プログラムの形成に影響を与えます。マウス細胞では、分化や増殖に協調したRNAプロセシングが必要とされる造血および発生過程において、RBM15の関与が示唆されています。RBM15に関連するRNA制御ネットワークの破綻は、がん化や異常な分化表現型の文脈で研究されており、RNA生物学および疾患モデルにおける機序解明研究を後押ししています。

RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるRbm15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Rbm15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Rbm15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、RBM15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、RBM15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Rbm15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• RBM15の機能に不可欠なRbm15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Rbm15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• RBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびRBM15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Rbm15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  RBM15 HDRプラスミド（m）および RBM15 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRbm15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRbm15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。