RBM15 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432890

Descripción general

Rbm15 codifica RBM15, una proteína de unión a ARN que participa en la regulación génica postranscripcional, incluida la selección alternativa de empalme (splicing), la exportación de ARNm y el control de su estabilidad. RBM15 está vinculada a la regulación epitranscriptómica mediante interacciones con complejos asociados a los “writers” de m6A, lo que moldea las transiciones de estado celular y los programas de expresión génica específicos de linaje. En células de ratón, RBM15 se ha implicado en procesos hematopoyéticos y del desarrollo en los que se requiere un procesamiento coordinado del ARN para la diferenciación y la proliferación. La desregulación de las redes de regulación del ARN asociadas a RBM15 se estudia en el contexto de la transformación oncogénica y de fenotipos de diferenciación aberrante, lo que respalda trabajos mecanísticos en biología del ARN y modelos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBM15 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rbm15 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rbm15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rbm15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBM15.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rbm15 para la investigación de la señalización de RBM15, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Rbm15 críticos para la función de RBM15
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rbm15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBM15 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RBM15 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rbm15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBM15 (m) y el plásmido HDR RBM15 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rbm15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rbm15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.