非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
RasGRP1 抗体 (A-7): sc-365358. Jurkat (A), Raji (B) 和 MOLT-4 (C) 全细胞裂解液中 RasGRP1 表达的 Western 印迹分析. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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RasGRP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (bovine): sc-437322
- 针对种属：bovine
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RasGRP1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（bovine） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在RasGRP1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RasGRP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (bovine) | sc-437322 | 20 µg | $397.00 |
概述
RasGRP1（RAS 鸟嘌呤释放蛋白 1）是一种对二酰甘油（DAG）和 Ca²⁺ 具有响应性的 Ras 鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF），可将受体驱动的磷脂酶 C（PLC）信号与 Ras 家族 GTP 酶的激活连接起来。通过促进 Ras 上 GDP 向 GTP 的交换，RasGRP1 有助于传递 MAPK/ERK 信号，并与 PI3K 通路的动态变化产生交叉作用，从而塑造细胞激活、增殖与分化等程序。在免疫细胞谱系中，RasGRP1 是抗原受体信号传导的关键介质，并影响下游转录反应的激活阈值。RasGRP1 信号失调与免疫稳态改变以及 Ras 通路调控受扰的致癌信号环境有关，因此在信号转导机制与细胞命运调控研究中具有重要意义。
RasGRP1 CRISPR/Cas9 KO质粒（bovine）是一组旨在针对性地破坏bovine细胞系中基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使RasGRP1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建缺失的细胞模型，用于RasGRP1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 RasGRP1 功能至关重要的 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 RasGRP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (bovine) 和 RasGRP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (bovine2) 编码的 gRNA 分别靶向 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 RasGRP1 HDR 质粒（bovine）编码的 HDR 供体构建体以及 RasGRP1 HDR质粒（bovine2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。