Plásmido Doble Nickase (h) RASA4B: sc-418861-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RASA4B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RASA4B (h) y el plásmido de doble nickasa RASA4B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RASA4B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RASA4B | sc-418861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RASA4B | sc-418861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RASA4B codifica una proteína activadora de la GTPasa Ras que favorece la conversión de Ras-GTP activo a Ras-GDP inactivo, actuando como regulador negativo de la señalización dependiente de Ras. Al atenuar las señales de entrada aguas arriba en las cascadas MAPK/ERK y PI3K-AKT, RASA4B ayuda a modular programas celulares que gobiernan la proliferación, la diferenciación y la dinámica de la señalización en respuesta al estrés. La desregulación del control de la vía de Ras se ha implicado ampliamente en la transformación oncogénica y en alteraciones de la señalización inmunitaria e inflamatoria, lo que convierte a RASA4B en un nodo útil para estudiar el ajuste fino de la vía en modelos relevantes para la enfermedad. Mapear la función de RASA4B puede aclarar cómo la amplitud y la duración de la señal de Ras influyen en las salidas transcripcionales y en las transiciones de estado celular.
RASA4B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RASA4B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RASA4B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RASA4B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RASA4B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.