RASA4B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418861-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RASA4BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RASA4B (h) e o Plasmídeo Double Nickase RASA4B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RASA4B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RASA4B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RASA4B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RASA4B codifica uma proteína ativadora de GTPase de Ras que promove a conversão de Ras-GTP ativo em Ras-GDP inativo, atuando como um regulador negativo da sinalização dependente de Ras. Ao atenuar os sinais a montante nas cascatas MAPK/ERK e PI3K-AKT, a RASA4B ajuda a moldar programas celulares que governam a proliferação, a diferenciação e a dinâmica de sinalização responsiva ao estresse. A desregulação do controle da via de Ras está amplamente implicada na transformação oncogênica e em alterações da sinalização imune e inflamatória, tornando a RASA4B um ponto útil para investigar o ajuste fino da via em modelos relevantes para doenças. O mapeamento da função de RASA4B pode esclarecer como a amplitude e a duração do sinal de Ras influenciam as saídas transcricionais e as transições de estado celular.
RASA4B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RASA4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RASA4B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RASA4B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RASA4B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.