Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rak Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405590
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rak El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rak, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rak Anticuerpo (H-12): sc-166478
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rak Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405590 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen humano **FRK** codifica **Rak**, una tirosina cinasa no receptora de la familia **BRK** que modula la señalización en la membrana plasmática y en el núcleo. Rak se ha relacionado con la regulación de vías de receptores tirosina cinasa, la dinámica del citoesqueleto y el control del ciclo celular mediante la remodelación dependiente de fosforilación de efectores aguas abajo. Al influir en la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés celular, la actividad de FRK/Rak se estudia en contextos de biología epitelial y redes de señalización oncogénica. La expresión alterada de FRK o la actividad de su cinasa se ha asociado con cambios en el comportamiento de células tumorales y en estados de transducción de señales, lo que respalda su relevancia como un nodo mecanístico en vías relacionadas con el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rak (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FRK en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FRK junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FRK tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rak.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FRK para la investigación de la señalización de Rak, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FRK críticos para la función de Rak
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FRK para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rak CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rak CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FRK. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rak (h) y el plásmido HDR Rak (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FRK para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FRK definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.