Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Raftlin-2 (h): sc-414360
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Raftlin-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Raftlin-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Raftlin-2 Antibody (F-7): sc-514540
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Raftlin-2 (h) | sc-414360 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RFTN2 code pour Raftlin-2, une protéine d’échafaudage associée aux radeaux lipidiques, qui contribue à organiser des microdomaines membranaires impliqués dans la signalisation des récepteurs immunitaires. Raftlin-2 favorise le trafic et la stabilisation des complexes de signalisation dans les cellules lymphoïdes, contribuant aux événements proximaux du récepteur des cellules B, aux cascades de kinases en aval et à l’endocytose régulée. Par son rôle dans la coordination de la transduction du signal dépendante des radeaux, RFTN2 est pertinent pour l’étude de l’activation des cellules immunitaires, de la réponse à l’antigène et de la modulation des voies inflammatoires. Une expression ou une fonction altérée présente un intérêt pour les recherches mécanistiques sur la dérégulation immunitaire, notamment dans des contextes liés à l’auto-immunité et à la biologie des maladies hématologiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Raftlin-2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RFTN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RFTN2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RFTN2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Raftlin-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RFTN2 pour l'étude de la signalisation de Raftlin-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RFTN2 essentiels à la fonction de Raftlin-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RFTN2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Raftlin-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Raftlin-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RFTN2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Raftlin-2 plasmide HDR (h) et le Raftlin-2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RFTN2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RFTN2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.