Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO RADX (h): sc-409991
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RADX Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RADX, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RADX Antibody (A-3): sc-514563
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RADX (h) | sc-409991 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CXorf57 code pour RADX, un facteur de liaison à l’ADN simple brin qui module la dynamique des fourches de réplication et contribue au maintien de la stabilité du génome pendant la phase S. RADX s’oppose au chargement de RAD51 sur les fourches de réplication bloquées, façonnant la recombinaison homologue et coordonnant les réponses au stress réplicatif. Par ces fonctions, il participe à la préservation de l’intégrité des fourches de réplication, à la suppression des recombinaisons aberrantes et au contrôle des voies de signalisation des dommages à l’ADN. La dérégulation de l’équilibre entre protection de la fourche et réparation lié à RADX est pertinente pour comprendre les mécanismes à l’origine des phénotypes d’instabilité génomique observés en biologie du cancer et dans d’autres modèles de maladies associées au stress réplicatif.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RADX (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CXorf57 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CXorf57, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CXorf57 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RADX.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CXorf57 pour l'étude de la signalisation de RADX, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CXorf57 essentiels à la fonction de RADX
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CXorf57 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RADX plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RADX plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CXorf57. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RADX plasmide HDR (h) et le RADX (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CXorf57 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CXorf57 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.