Partículas Lentivirales de Activación (m) Radixin: sc-422634-LAC

El gen Rdx de ratón codifica radixina, un andamiaje de la familia ERM (ezrina–radixina–moesina) que conecta la F-actina cortical con la membrana plasmática y organiza dominios de membrana especializados. La radixina regula la forma celular, la adhesión y la migración al coordinar la remodelación de actina con el posicionamiento de proteínas de membrana, influyendo en procesos como la formación de microvellosidades y la integridad de las uniones. Mediante interacciones con la señalización de la familia Rho y una activación dependiente de fosfoinosítidos, la radixina contribuye a la dinámica del citoesqueleto y a la mecanotransducción. La alteración de la función de la red ERM se ha asociado con desorganización epitelial, comportamiento invasivo y otros fenotipos relacionados con el citoesqueleto, relevantes para la biología del cáncer y estudios de la homeostasis tisular.

Las partículas de activación lentiviral Radixin (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Rdx en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Radixin (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Rdx, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Radixin. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Rdx y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.