Plásmido Doble Nickase (h) RADIL: sc-407813-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RADIL consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RADIL (h) y el plásmido de doble nickasa RADIL (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RADIL. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RADIL | sc-407813-NIC | 20 µg | $410.00 |
RADIL (Ras association and dilute domain containing) codifica un adaptador citoplasmático que conecta la señalización activada de pequeñas GTPasas con la remodelación del citoesqueleto y la motilidad celular. RADIL participa en la adhesión dependiente de integrinas, la dinámica de las adhesiones focales y la migración dirigida al coordinar entradas de señalización que regulan la organización de la actina y la polaridad celular. Por estas funciones, se estudia en procesos como el tráfico vascular y de células inmunitarias, la morfogénesis epitelial y programas de migración invasiva relevantes para la biología del cáncer. Las vías de migración asociadas a RADIL desreguladas se han relacionado con un potencial metastásico alterado y con cambios en las interacciones célula–matriz en múltiples sistemas experimentales.
RADIL El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RADIL en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RADIL. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RADIL. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RADIL alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.