Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Rad51C: sc-403060-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Rad51C consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Rad51C (h) y el plásmido de doble nickasa Rad51C (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RAD51C. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rad51C Anticuerpo (2H11): sc-56214
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Rad51C | sc-403060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Rad51C | sc-403060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD51C codifica Rad51C, un parálogo de RAD51 que actúa en la recombinación homóloga y en la red de reparación del ADN Fanconi anemia–BRCA para resolver roturas de doble cadena e intercruzamientos entre hebras. Rad51C participa en la dinámica de los filamentos de RAD51 y en el procesamiento de las uniones de Holliday, contribuyendo a la estabilidad de la horquilla de replicación y a la integridad del genoma durante las fases S/G2. La alteración de RAD51C se asocia con respuestas defectuosas al daño del ADN, inestabilidad cromosómica y mayor sensibilidad al estrés genotóxico, lo que lo convierte en un nodo clave en las vías que regulan la tolerancia al estrés replicativo. Estas propiedades vinculan RAD51C con mecanismos subyacentes a la predisposición hereditaria al cáncer y a trastornos relacionados con la reparación del ADN, lo que respalda su uso para estudiar fenotipos de mantenimiento del genoma.
Rad51C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RAD51C en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RAD51C. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RAD51C. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RAD51C alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.