Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 7L1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403366
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rab 7L1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rab 7L1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 7L1 Anticuerpo (D-8): sc-398274
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rab 7L1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403366 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RAB29 codifica Rab 7L1, una pequeña GTPasa Rab que regula el tráfico de membranas, con funciones destacadas en la red trans-Golgi y en las interfaces endosómicas. Rab 7L1 participa en la gemación de vesículas, la clasificación de carga y las vías de reciclaje que modulan la homeostasis relacionada con los lisosomas y el posicionamiento de orgánulos mediante interacciones coordinadas, dependientes de GTP, con proteínas efectoras. En células humanas, RAB29 se ha vinculado a procesos relevantes para la biología neuronal y de células inmunitarias, incluidas vías que implican la dinámica vesicular asociada a LRRK2 y el tráfico sensible al estrés. Por ello, la alteración de la función de Rab 7L1 se estudia en el contexto de cambios en el transporte endolisosomal, el recambio proteico y las salidas de señalización implicadas en mecanismos relacionados con la neurodegeneración.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rab 7L1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAB29 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAB29 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAB29 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rab 7L1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAB29 para la investigación de la señalización de Rab 7L1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RAB29 críticos para la función de Rab 7L1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAB29 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rab 7L1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rab 7L1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAB29. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rab 7L1 (h) y el plásmido HDR Rab 7L1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAB29 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAB29 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.