Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 25 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404721
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rab 25 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rab 25, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 25 Anticuerpo (3F12F3): sc-65978
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rab 25 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404721 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RAB25 codifica Rab25, una pequeña GTPasa de la familia Rab que regula la gemación, el tráfico y el reciclaje de vesículas, con funciones destacadas en el transporte hacia la membrana apical y en la clasificación endosomal. Al controlar la entrega de carga y el reciclaje de receptores, Rab25 influye en la polaridad epitelial, la rotación de integrinas y la propagación de señales a través de vías vinculadas a la adhesión y la migración celular. La expresión alterada de RAB25 y los circuitos de tráfico asociados se han relacionado con la biología tumoral de manera dependiente del contexto, incluidos efectos sobre la capacidad invasiva y la adaptación metabólica. Como nodo de tráfico, Rab25 también es relevante para estudiar la dinámica de membranas, la organización de las uniones estrechas y la señalización impulsada por receptores en células humanas polarizadas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rab 25 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAB25 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAB25 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAB25 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rab 25.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAB25 para la investigación de la señalización de Rab 25, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RAB25 críticos para la función de Rab 25
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAB25 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rab 25 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rab 25 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAB25. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rab 25 (h) y el plásmido HDR Rab 25 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAB25 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAB25 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.