Plásmido Doble Nickase (h) Rab 24: sc-407266-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Rab 24 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Rab 24 (h) y el plásmido de doble nickasa Rab 24 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RAB24. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 24 Anticuerpo (43): sc-136049
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Rab 24 | sc-407266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Rab 24 | sc-407266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAB24 codifica Rab24, una pequeña GTPasa de la familia Rab que regula eventos de tráfico de membranas vinculados a la dinámica endosomal tardía, las vías relacionadas con los lisosomas y la autofagia. Se ha implicado a Rab24 en la maduración de los autofagosomas y en procesos de transporte vesicular que coordinan la homeostasis celular bajo estrés. La actividad alterada de RAB24 se ha asociado con defectos en la proteostasis y en el recambio de orgánulos, lo que conecta su función con fenotipos celulares relevantes para la neurodegeneración y las miopatías. Como regulador del tráfico, Rab24 constituye un punto manejable para analizar la comunicación cruzada entre la clasificación endosomal, la función lisosomal y el flujo autofágico.
Rab 24 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RAB24 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RAB24. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RAB24. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RAB24 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.