Plásmido Doble Nickase (m2) R-Spondin3: sc-428439-NIC-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m2)R-Spondin3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa R-Spondin3 (m2) y el plásmido de doble nickasa R-Spondin3 (m22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rspo3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m2) R-Spondin3 | sc-428439-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino Rspo3 codifica R‑Spondin3, un ligando matricelular secretado que potencia la señalización canónica WNT/β‑catenina al interactuar con receptores LGR y neutralizar el complejo de ligasas de ubiquitina ZNRF3/RNF43 para estabilizar los receptores Frizzled/LRP en la superficie celular. Desempeña funciones centrales en la morfogénesis embrionaria, el desarrollo vascular, el patrón tisular y el mantenimiento de células madre/progenitoras, integrando señales de la matriz extracelular para moldear programas epitelio‑mesenquimales y angiogénicos. La actividad desregulada del eje RSPO3–WNT se ha implicado en organogénesis aberrante y remodelación tisular patológica, incluidos contextos vinculados a la tumorigenesis y la fibrosis. Por ello, Rspo3 se utiliza ampliamente en modelos murinos y sistemas in vitro para investigar la regulación de la vía WNT, la señalización del nicho y redes génicas del desarrollo mediante edición del genoma, ensayos con reporteros y estudios de organoides o de diferenciación endotelial.
R-Spondin3 El plásmido de doble nicasa (m2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rspo3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rspo3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rspo3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rspo3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.