Plasmide Double Nickase (h) quiescin Q6: sc-405059-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) quiescin Q6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide quiescin Q6 Double Nickase (h) et le plasmide quiescin Q6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant QSOX1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) quiescin Q6 | sc-405059-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) quiescin Q6 | sc-405059-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
QSOX1 code la quiescine Q6 (QSOX1), une oxydase des groupements sulfhydryles dépendante de la flavine, qui catalyse la formation de ponts disulfure lors de la maturation des protéines et du remodelage de la matrice extracellulaire (MEC). L’enzyme agit au sein de la voie de sécrétion et dans les compartiments extracellulaires pour favoriser le repliement oxydatif et la stabilisation des protéines, influençant l’adhérence cellulaire, la migration et l’homéostasie rédox. L’activité de QSOX1 s’articule avec la protéostasie et des processus de signalisation associés à la MEC qui façonnent l’architecture tissulaire et les réponses cellulaires au stress. Une expression altérée de QSOX1 a été rapportée dans des contextes pertinents pour la fibrose, le remodelage du microenvironnement tumoral et le remodelage tissulaire inflammatoire, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de la dynamique de la MEC régulée par le rédox.
quiescin Q6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus QSOX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de QSOX1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de QSOX1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de QSOX1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.