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Partículas Lentivirales de Activación (m) PTPσ | sc-422531-LAC | 200 µl | $455.00 |
Ptprs codifica la tirosina fosfatasa sigma (PTPσ), una fosfatasa de tipo receptor enriquecida en el sistema nervioso que modula la fosforilación de tirosina en la superficie celular. PTPσ participa en la guía axonal, la organización de sinapsis y el crecimiento de neuritas al integrar señales extracelulares de proteoglicanos de heparán sulfato y condroitín sulfato con la señalización intracelular que regula la adhesión y la dinámica del citoesqueleto. A través de estas interacciones, Ptprs influye en la conectividad y la plasticidad neuronales, y se ha estudiado en contextos de inhibición del crecimiento asociada a lesiones y de fenotipos del neurodesarrollo. Además de sus funciones neuronales, PTPσ puede afectar procesos más amplios de comunicación celular, lo que la hace relevante para desentrañar redes de señalización reguladas por la actividad de fosfatasas receptoras.
Las partículas de activación lentiviral PTPσ (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Ptprs en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral PTPσ (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Ptprs, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PTPσ. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Ptprs y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.