Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTP-H1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404194
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PTP-H1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PTP-H1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PTP-H1 Anticuerpo (H-6): sc-515181
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PTP-H1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404194 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PTPN3 codifica la fosfatasa de tirosina no receptora PTP-H1, un regulador citosólico que contrarresta la señalización mediada por quinasas al desfosforilar residuos de fosfotirosina en sustratos receptores y no receptores. Al modular la dinámica de la fosforilación en tirosina, PTP-H1 influye en vías que controlan el crecimiento celular, la adhesión y la remodelación del citoesqueleto, con efectos downstream sobre MAPK y otras redes de señalización dependientes de la fosforilación. Se ha implicado una actividad o expresión alteradas de PTPN3 en una transducción de señales desregulada en contextos relacionados con el cáncer y en fenotipos celulares asociados a migración e invasión aberrantes. Como nodo de señalización, PTP-H1 se estudia con frecuencia por su contribución al ajuste fino de vías oncogénicas y al control dependiente del contexto de las salidas de señalización de receptores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTP-H1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPN3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPN3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPN3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTP-H1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPN3 para la investigación de la señalización de PTP-H1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PTPN3 críticos para la función de PTP-H1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPN3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PTP-H1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTP-H1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPN3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTP-H1 (h) y el plásmido HDR PTP-H1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPN3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPN3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.