Partículas Lentivirales de Activación (h) PSM: sc-401947-LAC

FOLH1 codifica el antígeno de membrana específico de próstata (PSM), una metaloproteasa transmembrana de tipo II dependiente de zinc, con actividades de hidrolasa de folato y NAALADasa, que regulan el procesamiento extracelular del folato y la señalización glutamatérgica. La proteína influye en la captación de nutrientes y en el metabolismo de neurotransmisores mediante la escisión de folatos poli-γ-glutamados y de N-acetilaspartilglutamato, lo que la vincula con la disponibilidad de aminoácidos y la homeostasis sináptica. La expresión de FOLH1 está muy enriquecida en el epitelio prostático y se utiliza ampliamente como marcador molecular en estudios de biología de la próstata, mientras que su actividad enzimática en tejidos neurales respalda investigaciones sobre la neurotransmisión excitatoria y procesos neuroinflamatorios. La desregulación de la expresión y la actividad de FOLH1/PSM se ha asociado con la biología del cáncer de próstata y con vías relevantes para la neurodegeneración y la remodelación del microambiente asociado a tumores.

Las partículas de activación lentiviral PSM (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FOLH1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral PSM (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FOLH1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PSM. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FOLH1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.