PSIP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404589

Descripción general

PSIP1 (también conocido como LEDGF/p75) es un cofactor transcripcional asociado a la cromatina que se une a genes activos marcados con H3K36me3 a través de su dominio PWWP y ayuda a organizar la elongación transcripcional, el procesamiento de ARN y las respuestas al daño del ADN. Al interactuar con factores implicados en el estrés replicativo y la reparación de roturas de doble cadena, PSIP1 contribuye a la estabilidad del genoma y a la supervivencia celular en condiciones genotóxicas. PSIP1 también es conocido por anclar la integrasa viral a la cromatina, influyendo en la selección de los sitios de integración, y participa en programas regulatorios vinculados a la transcripción oncogénica y a la señalización del estrés celular. La desregulación de las interacciones de PSIP1 con la cromatina se ha estudiado en contextos como neoplasias hematológicas y otros cánceres, en los que se alteran el control transcripcional y el equilibrio de las vías de reparación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PSIP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PSIP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PSIP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PSIP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PSIP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PSIP1 para la investigación de la señalización de PSIP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PSIP1 críticos para la función de PSIP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PSIP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PSIP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PSIP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PSIP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PSIP1 (h) y el plásmido HDR PSIP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PSIP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PSIP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.