PSGL-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401534-LAC

SELPLG kodiert den P‑Selectin‑Glykoproteinliganden‑1 (PSGL‑1), ein mucinartiges Sialomucin, das auf Leukozyten exprimiert wird und über Interaktionen mit P‑Selectin und E‑Selectin das Anheften und Rollen auf aktiviertem Endothel vermittelt. Durch die Koordination selektinabhängiger Adhäsion unter Scherströmung trägt PSGL‑1 zur Regulation des Leukozyten-Traffickings, der Extravasation und der Positionierung von Immunzellen in entzündetem Gewebe bei und greift dabei in Signalwege ein, die Zell‑Zell‑Adhäsion, chemokingesteuerte Migration und inflammatorische Signalübertragung steuern. Eine veränderte PSGL‑1‑Funktion oder sein Glykosylierungszustand kann die Dynamik der Leukozytenrekrutierung verschieben und wurde im Kontext chronischer Entzündungen, vaskulärer Inflammation und immunologischer Dysregulation untersucht, was für die Onkologie- und Autoimmunitätsforschung relevant ist.

PSGL-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SELPLG-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PSGL-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SELPLG-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PSGL-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SELPLG-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.