Plásmido Doble Nickase (h) PSD-93: sc-405011-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PSD-93 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PSD-93 (h) y el plásmido de doble nickasa PSD-93 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DLG2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PSD-93 | sc-405011-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PSD-93 | sc-405011-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DLG2 codifica la proteína 93 de la densidad postsináptica (PSD-93), un andamiaje de la familia MAGUK enriquecido en sinapsis excitadoras, donde organiza complejos de receptores glutamatérgicos y los acopla a la señalización aguas abajo. PSD-93 contiene dominios PDZ, SH3 y GK que coordinan el tráfico y la estabilización de proteínas asociadas a los receptores NMDA/AMPA, modulando la fuerza sináptica y la plasticidad dependiente de la actividad. Mediante interacciones dentro de la densidad postsináptica, DLG2 influye en la maduración de las sinapsis, la conectividad neuronal y las vías de transducción de señales que regulan el funcionamiento de circuitos relacionados con el aprendizaje. Estudios genéticos y funcionales han vinculado la alteración de la expresión de DLG2 o sus variantes con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su uso como punto de entrada molecular para desentrañar mecanismos de disfunción sináptica.
PSD-93 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DLG2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DLG2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DLG2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DLG2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.