Plásmido Doble Nickase (h) PRMT2: sc-405107-NIC

PRMT2 codifica una metiltransferasa de arginina en proteínas de tipo I que cataliza la dimetilación asimétrica de residuos de arginina en histonas y otras proteínas nucleares, modelando la estructura de la cromatina y el resultado transcripcional. Mediante la modulación de programas reguladores vinculados a la ARN polimerasa II y de interacciones proteína–proteína dependientes de metilación, PRMT2 contribuye al control de la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés celular. PRMT2 se ha implicado en la comunicación cruzada con la señalización de receptores hormonales y con redes transcripcionales asociadas a NF-κB, lo que vincula su actividad con una regulación inflamatoria y metabólica dependiente del contexto. La expresión o actividad desregulada de PRMT2 se ha asociado con estados transcripcionales oncogénicos y otros fenotipos complejos de enfermedad, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación epigenética.

PRMT2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PRMT2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PRMT2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PRMT2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PRMT2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.