PRMT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420951

Descripción general

Prmt2 codifica la proteína arginina metiltransferasa 2 (PRMT2), una PRMT de tipo I que cataliza la dimetilación asimétrica de residuos de arginina en histonas y en sustratos no histónicos para modular la estructura de la cromatina y la función proteica. La actividad de PRMT2 influye en la regulación transcripcional y en la dinámica de los correaguladores en vías de señalización de receptores nucleares y otras, vinculando la metilación de arginina con programas de expresión génica dependientes del contexto. En sistemas murinos, PRMT2 se ha asociado con el control de la proliferación celular, la diferenciación y la regulación de genes inflamatorios mediante mecanismos epigenéticos y postraduccionales. La metilación y las redes transcripcionales dependientes de PRMT2 desreguladas se han implicado en procesos relevantes para enfermedades, como la señalización asociada a tumores, las respuestas al estrés metabólico y la disfunción inmunitaria, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios de vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRMT2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prmt2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prmt2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prmt2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRMT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prmt2 para la investigación de la señalización de PRMT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prmt2 críticos para la función de PRMT2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prmt2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRMT2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PRMT2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prmt2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRMT2 (m) y el plásmido HDR PRMT2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prmt2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prmt2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.