Plásmido Doble Nickase (r) PRL: sc-437302-NIC
- Especies Diana: rat
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (r)PRL consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PRL (r) y el plásmido de doble nickasa PRL (r2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a . Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (r) PRL | sc-437302-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (r2) PRL | sc-437302-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La prolactina (PRL) es una hormona peptídica pleiotrópica conocida sobre todo por regular la lactancia y el desarrollo de la glándula mamaria, y también por influir en la reproducción, la homeostasis metabólica y la modulación inmunitaria en roedores. La PRL señaliza principalmente a través del receptor de prolactina para activar programas transcripcionales JAK2/STAT5 y establecer comunicación cruzada con las vías PI3K/AKT y MAPK, lo que determina la supervivencia celular, la diferenciación y la función secretora. En la fisiología de la rata, las alteraciones en la señalización de PRL se estudian con frecuencia en el contexto de la regulación del eje hipotálamo‑hipófisis, el control endocrino sensible al estrés y la remodelación tisular. La actividad desregulada de la vía de PRL es relevante en modelos experimentales de hiperprolactinemia, infertilidad, biología de los lactotrofos hipofisarios y fenotipos proliferativos de la glándula mamaria.
PRL El plásmido de doble nicasa (r) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus en líneas celulares rat. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de . Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de . Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.