Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
PRDM8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406359
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PRDM8 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PRDM8, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PRDM8 Anticuerpo (E-3): sc-390001
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PRDM8 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406359 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PRDM8 (dominio PR/SET 8) codifica un regulador transcripcional con dominio PR/SET que influye en el estado de la cromatina y en los programas de expresión génica durante el desarrollo. Como miembro de la familia PRDM, PRDM8 está vinculado a mecanismos de control epigenético que modelan la diferenciación neuronal, la guía axonal y redes transcripcionales más amplias específicas de linaje. La regulación alterada de las vías asociadas a PRDM8 puede perturbar las decisiones de destino celular y se ha investigado en el contexto de disfunción del neurodesarrollo y de la desregulación transcripcional observada en paisajes epigenéticos relevantes para el cáncer. El estudio de PRDM8 permite el análisis mecanístico de la represión/activación mediada por cromatina, del control potenciador–promotor y de los efectos posteriores sobre la proliferación y la diferenciación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRDM8 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRDM8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRDM8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRDM8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRDM8.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRDM8 para la investigación de la señalización de PRDM8, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PRDM8 críticos para la función de PRDM8
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRDM8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PRDM8 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRDM8 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRDM8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRDM8 (h) y el plásmido HDR PRDM8 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRDM8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRDM8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.