PRDM15 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404932-LAC

PRDM15 (PR/SET-Domäne 15) ist ein nukleärer Transkriptionsregulator, der Zinkfinger- sowie PR/SET-verwandte Domänen enthält, die eine sequenzspezifische Chromatinbindung und die Kontrolle der Transkription unterstützen. Es trägt zur epigenetischen Regulation von Genexpressionsprogrammen bei, die mit Zellidentität, Proliferation und Entwicklungsprozessen verknüpft sind, indem es chromatinassoziierte Komplexe an Promotor- und Enhancer-Regionen koordiniert. Eine veränderte PRDM15-Aktivität wurde mit fehlregulierten Transkriptionsnetzwerken und epigenomischen Zuständen in Verbindung gebracht, wie sie in der Krebsbiologie und bei Entwicklungsstörungen beobachtet werden, was PRDM15 für die Untersuchung von Lineage-Festlegung und onkogenen Abhängigkeiten der Genexpression relevant macht. Die Untersuchung von PRDM15 hilft zu verstehen, wie chromatinmodifizierende Transkriptionsfaktoren Signale integrieren, um Transkriptionsausgaben zu formen.

PRDM15 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PRDM15-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PRDM15 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PRDM15-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PRDM15-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PRDM15-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.