Particules Lentivirales d'Activation (h) PPARβ: sc-400523-LAC

PPARD code le récepteur activé par les proliférateurs de peroxysomes bêta/delta (PPARβ), un récepteur nucléaire activé par un ligand qui s’hétérodimérise avec RXR pour réguler des programmes transcriptionnels contrôlant l’utilisation des lipides, l’oxydation des acides gras, le métabolisme énergétique mitochondrial et la différenciation cellulaire. PPARβ intègre des signaux métaboliques et inflammatoires via des éléments de réponse PPAR, en recoupant des voies telles que AMPK, PI3K–AKT et MAPK afin de moduler la survie cellulaire et les réponses au stress. Dans divers tissus, PPARD influence la gestion du glucose, l’homéostasie lipidique et la polarisation des cellules immunitaires, ce qui en fait une cible fréquente des études sur la dérégulation métabolique, l’inflammation chronique et des rôles dépendants du contexte dans la signalisation oncogénique. Une activité PPARD altérée a été associée à des modifications du métabolisme oxydatif, de la capacité proliférative et de la fonction barrière, ce qui souligne sa pertinence pour la recherche sur les mécanismes des maladies.

Les particules d'activation lentivirales PPARβ (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de PPARD dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales PPARβ (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription PPARD, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de PPARβ. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif PPARD ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.