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PPARα慢病毒激活颗粒(h) | sc-400238-LAC | 200 µl | $455.00 |
PPARA 编码过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),这是一种配体激活的核受体,负责调控转录程序,从而控制脂质摄取、线粒体与过氧化物酶体的β-氧化以及酮体生成。PPARα 与 RXR 形成异源二聚体,并结合 PPAR 反应元件,在禁食及高脂肪酸通量条件下协调代谢适应,整合来自脂肪酸和类二十烷酸的信号。它还通过与 NF-κB 及其他转录调控因子的串扰,参与调控脂蛋白代谢、胆汁酸稳态以及炎症相关基因的表达。PPARα 信号失调与多种代谢功能异常状态相关,包括血脂异常和脂肪肝表型,并且常在心代谢应激反应的研究背景下被重点关注。
PPARα 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PPARA 表达。
PPARα 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PPARA转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PPARα表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PPARA 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。