Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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POL H Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401794-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- POL HO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase POL H (h) e o Plasmídeo Double Nickase POL H (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POLH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:POL H Anticorpo (B-7): sc-17770
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
POL H Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
POL H Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
POLH codifica a DNA polimerase eta (POL H), uma polimerase de síntese por translesão da família Y que permite a replicação através de lesões volumosas no DNA, particularmente dímeros de pirimidina ciclobutano induzidos por UV, limitando assim o bloqueio da forquilha de replicação e a instabilidade genómica. A POL H atua em vias de tolerância a danos no DNA e de reparação pós-replicativa, coordenando-se com a ubiquitinação do PCNA e o eixo RAD6/RAD18 para alternar entre polimerases replicativas e polimerases de bypass de lesões. Defeitos em POLH comprometem o bypass correto de lesões e aumentam a mutagénese, ligando a atividade de POLH a vias que moldam a integridade genómica sob stress genotóxico. Por isso, POLH é amplamente estudada nos mecanismos de resposta à radiação UV, nas assinaturas mutacionais e na biologia do stress replicativo em células humanas.
POL H O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POLH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POLH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POLH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POLH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.