Plfr Lentiviral Activation Particles (m): sc-422306-LAC

Prl7d1 kodiert das Mausprotein der Prolaktin-Familie 7, Subfamilie d, Mitglied 1 (Plfr), einen sezernierten, zytokinähnlichen Faktor, der vorwiegend mit Reproduktionsgeweben und der Plazentabiologie assoziiert ist. Als Teil der erweiterten Prolaktin-Genfamilie der Nagetiere ist Plfr mit einer endokrin-parakrinen Kommunikation verknüpft, die die Differenzierung von Trophoblasten, den Umbau der uteroplazentaren Grenzfläche und maternale–fetale Anpassungen unterstützt. Die Signalgebung der Prolaktin-Familie greift in JAK/STAT-regulierte Transkriptionsprogramme sowie in umfassendere entzündliche und metabolische Prozesse ein, die die Physiologie der Schwangerschaft prägen. Eine veränderte Expression plazentarer Prolaktin-Familiengene wird in Mausmodellen häufig im Zusammenhang mit Einnistungsversagen, Plazentainsuffizienz, fetaler Wachstumsrestriktion und maternaler metabolischer Dysregulation untersucht.

Plfr Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Prl7d1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Plfr Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Prl7d1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Plfr-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Prl7d1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.