Placental lactogen II Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422277

Descripción general

Prl3b1 codifica el lactógeno placentario II del ratón, una citocina de la familia de la prolactina/hormona del crecimiento expresada predominantemente por linajes de trofoblasto durante la gestación. El lactógeno placentario II favorece las adaptaciones materno‑fetales al modular procesos endocrinos y metabólicos, incluida la señalización a través del receptor de prolactina (PRLR) con programas transcripcionales aguas abajo JAK2–STAT5 que influyen en el manejo de nutrientes y la remodelación de los tejidos maternos. En la placenta, la actividad de Prl3b1 se asocia con la diferenciación del trofoblasto y la regulación de la fisiología materna, por lo que es relevante para estudiar el desarrollo placentario y la comunicación endocrina. La desregulación de la señalización del lactógeno placentario se ha relacionado con alteraciones del crecimiento fetal y complicaciones del embarazo en sistemas modelo, lo que sitúa a Prl3b1 como un locus útil para investigaciones mecanísticas de la disfunción placentaria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Placental lactogen II (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Prl3b1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Prl3b1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Prl3b1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Placental lactogen II.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Prl3b1 para la investigación de la señalización de Placental lactogen II, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Prl3b1 críticos para la función de Placental lactogen II
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Prl3b1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Prl3b1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Placental lactogen II (m) y el plásmido HDR Placental lactogen II (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Prl3b1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Prl3b1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.