Plasmide CRISPR/Cas9 KO Placental lactogen Iα (m): sc-422276

Présentation

Prl3d1 code la lactogène placentaire Iα de la souris, une hormone de la famille prolactine/hormone de croissance produite principalement par les lignages trophoblastiques pendant la grossesse. La lactogène placentaire Iα active la signalisation via le récepteur de la prolactine, modulant la voie JAK2–STAT5 et des programmes transcriptionnels associés qui coordonnent les adaptations métaboliques maternelles et soutiennent la croissance fœtale par des effets endocrines et paracrines. Dans le placenta, Prl3d1 contribue à la différenciation du trophoblaste, à la fonction endocrine placentaire et à la régulation de l’allocation des nutriments à l’interface materno-fœtale. Le dérèglement des voies de la lactogène placentaire est fréquemment étudié dans des modèles de placentation altérée, de retard de croissance fœtale et de phénotypes métaboliques associés à la grossesse.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Placental lactogen Iα (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Prl3d1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Prl3d1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Prl3d1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Placental lactogen Iα.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Prl3d1 pour l'étude de la signalisation de Placental lactogen Iα, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Prl3d1 essentiels à la fonction de Placental lactogen Iα
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Prl3d1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Placental lactogen Iα plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Placental lactogen Iα plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Prl3d1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Placental lactogen Iα plasmide HDR (m) et le Placental lactogen Iα (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Prl3d1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Prl3d1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.