Plásmido Doble Nickase (m) PLAC8: sc-433072-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PLAC8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PLAC8 (m) y el plásmido de doble nickasa PLAC8 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Plac8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PLAC8 | sc-433072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) PLAC8 | sc-433072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Plac8 codifica PLAC8, una pequeña proteína rica en cisteína identificada originalmente en tejido placentario que se expresa de forma amplia en contextos epiteliales y relacionados con el sistema inmunitario en el ratón. PLAC8 se ha vinculado con la regulación de la diferenciación celular, las respuestas al estrés y procesos asociados a la membrana, y se ha descrito que influye en programas de señalización conectados con la inmunidad innata y el remodelado inflamatorio. La alteración de la expresión de PLAC8 se ha asociado con cambios en la proliferación, la migración y la adaptación metabólica en sistemas experimentales, lo que la hace relevante para la investigación en biología tumoral, lesión tisular e interacciones huésped–patógeno. Por ello, en modelos murinos, Plac8 se estudia con frecuencia como un modulador dependiente del contexto de la homeostasis epitelial y de la función de las células inmunitarias.
PLAC8 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Plac8 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Plac8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Plac8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Plac8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.