Plásmido Doble Nickase (h) PLA2R: sc-411636-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PLA2R consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PLA2R (h) y el plásmido de doble nickasa PLA2R (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PLA2R1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PLA2R | sc-411636-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PLA2R | sc-411636-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLA2R1 codifica el receptor de fosfolipasa A2 de tipo M (PLA2R), un miembro de la familia de lectinas tipo C con un único paso transmembrana que se une a enzimas de fosfolipasa A2 secretadas y a otros ligandos extracelulares para regular la endocitosis mediada por receptor, el aclaramiento de ligandos y la señalización aguas abajo. A través de sus dominios extracelulares de reconocimiento, PLA2R influye en las vías de mediadores lipídicos inflamatorios y en respuestas celulares relacionadas con la remodelación de membranas y el estrés oxidativo. La expresión de PLA2R1 y el recambio del receptor se han asociado con daño tisular de origen inmunitario e inflamación específica de órganos, lo que respalda su uso como punto de entrada molecular para estudiar la dinámica receptor–ligando en contextos relevantes para la enfermedad. En biología renal, PLA2R es un objetivo antigénico clave en trastornos glomerulares autoinmunes, por lo que la perturbación de PLA2R1 resulta útil para estudios mecanísticos de presentación de antígenos, unión de anticuerpos y respuestas de estrés celular.
PLA2R El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PLA2R1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PLA2R1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PLA2R1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PLA2R1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.