PLA2R Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422280

Descripción general

Pla2r1 codifica PLA2R, un receptor de lectina tipo C transmembrana de tipo I que se une a enzimas fosfolipasa A2 secretadas y contribuye a la captura de ligandos extracelulares y a la endocitosis mediada por receptor. Al regular la internalización de ligandos y las señales asociadas a la membrana, PLA2R influye en la disponibilidad de mediadores lipídicos, el tono inflamatorio y las interacciones célula–matriz de manera dependiente del contexto. En tejidos de ratón, la expresión de Pla2r1 se ha relacionado con la biología inmunitaria y estromal, con relevancia descrita para procesos inflamatorios y la remodelación fibrótica. La actividad alterada de la vía de PLA2R se investiga con frecuencia en modelos de lesión orgánica y respuestas tisulares impulsadas por el sistema inmunitario, donde la dinámica receptor–ligando puede modular programas transcripcionales y metabólicos posteriores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PLA2R (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Pla2r1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Pla2r1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Pla2r1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PLA2R.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Pla2r1 para la investigación de la señalización de PLA2R, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Pla2r1 críticos para la función de PLA2R
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Pla2r1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PLA2R CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido PLA2R CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Pla2r1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PLA2R (m) y el plásmido HDR PLA2R (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Pla2r1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Pla2r1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.