Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
PKDCC Plasmide Double Nickase (m): sc-430656-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PKDCC Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PKDCC Double Nickase Plasmid (m) e il PKDCC Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Pkdcc. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PKDCC Antibody (G-10): sc-514504
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PKDCC Plasmide Double Nickase (m) | sc-430656-NIC | 20 µg | $410.00 |
Pkdcc codifica PKDCC, una chinasi proteica atipica Ser/Thr secreta o associata al Golgi, implicata nella regolazione degli ambienti di segnalazione extracellulari durante lo sviluppo. PKDCC è stata collegata al controllo della comunicazione cellula–cellula e di vie correlate ai morfogeni che influenzano proliferazione e differenziamento, con associazioni riportate con la segnalazione Hedgehog e con programmi di patterning scheletrico. Nei sistemi murini, la perturbazione della funzione di Pkdcc viene utilizzata per studiare i meccanismi alla base dello sviluppo craniofacciale e osseo, nonché, più in generale, la regolazione chinasi-dipendente della morfogenesi tissutale. Queste caratteristiche rendono PKDCC un nodo utile per indagare come l’attività di una chinasi secreta modelli gradienti di segnalazione e fenotipi dello sviluppo.
PKDCC Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Pkdcc nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Pkdcc. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Pkdcc. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Pkdcc interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.