Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PIG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403356
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PIG3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PIG3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PIG3 Anticuerpo (A-5): sc-166664
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PIG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403356 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TP53I3 codifica PIG3, una oxidorreductasa inducible por p53 que contribuye a las respuestas al estrés celular al modular la homeostasis redox y la dinámica de las especies reactivas de oxígeno (ROS). PIG3 está vinculada a vías dependientes de p53 que controlan la señalización del daño en el ADN, la apoptosis y la regulación de los puntos de control del ciclo celular, y se ha estudiado como efector downstream que influye en fenotipos impulsados por el estrés oxidativo. La expresión alterada de TP53I3/PIG3 se ha asociado con la biología tumoral y la sensibilidad al estrés genotóxico, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos sobre la integridad de la red de p53 y la señalización regulada por el estado redox en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PIG3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TP53I3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TP53I3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TP53I3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PIG3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TP53I3 para la investigación de la señalización de PIG3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TP53I3 críticos para la función de PIG3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TP53I3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PIG3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PIG3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TP53I3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PIG3 (h) y el plásmido HDR PIG3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TP53I3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TP53I3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.