Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PIDD Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403439
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PIDD El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PIDD, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PIDD Anticuerpo (B-5): sc-514981
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PIDD Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403439 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PIDD1 codifica la proteína PIDD (proteína con dominio de muerte inducida por p53), un andamiaje de señalización implicado en las respuestas celulares al estrés y en la regulación de la apoptosis. PIDD participa en la formación de complejos multiproteicos como el PIDDosoma, conectando el estrés genotóxico con la activación de la caspasa-2 y con decisiones posteriores sobre el destino celular. Más allá de la apoptosis, PIDD se ha asociado con procesos relacionados con el centrosoma y con la señalización del daño en el ADN que influyen en el control del ciclo celular y la estabilidad genómica. La desregulación de estas vías es relevante para estudios de biología del cáncer, fenotipos del neurodesarrollo y otras afecciones en las que se ven alteradas la señalización del estrés, la apoptosis o el mantenimiento cromosómico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PIDD (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PIDD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PIDD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PIDD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PIDD.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PIDD1 para la investigación de la señalización de PIDD, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PIDD1 críticos para la función de PIDD
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PIDD1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PIDD CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PIDD CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PIDD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PIDD (h) y el plásmido HDR PIDD (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PIDD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PIDD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.