Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PIASy Antibody (C-11): sc-166706. Western blot analysis of PIASy expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human PIASy transfected: sc-114469 (B) 293T whole cell lysates.
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PIASy双切口酶质粒(h): sc-403125-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PIASy 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PIASy双切酶质粒（h）和PIASy双切酶质粒（h2）编码针对PIAS4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PIASy: sc-166706，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PIASy双切口酶质粒(h) | sc-403125-NIC | 20 µg | $410.00 |
PIAS4 编码 PIASy，这是一种 SUMO E3 连接酶，可通过 SUMO 化调节转录因子活性与蛋白稳定性。PIASy 参与调控 JAK/STAT 与 NF-κB 信号通路、DNA 损伤应答以及与染色质相关的转录控制，其作用对象包括 p53 及其他应激反应相关调控因子。通过精细调节翻译后修饰网络，PIASy 影响细胞周期进程、细胞凋亡以及先天免疫信号程序。PIAS4/PIASy 活性失衡与炎症信号异常及致癌性转录状态相关，因此在癌症生物学与免疫相关通路的机制研究中具有重要意义。
PIASy 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PIAS4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PIAS4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PIAS4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PIAS4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。