Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PIASy Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403125
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PIASy O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PIASy, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PIASy Anticorpo (C-11): sc-166706
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PIASy Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403125 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PIAS4 codifica a PIASy, uma ligase E3 de SUMO que modula a SUMOilação de proteínas para ajustar finamente programas transcricionais, respostas a danos no DNA e a sinalização imune inata. A PIASy regula a atividade, a localização e a estabilidade de diversos fatores de transcrição e intermediários de sinalização, conectando o controle dependente de SUMO a vias como NF-κB, respostas ao interferon e redes ativadas por estresse. Por meio desses mecanismos, a PIASy influencia a progressão do ciclo celular, a apoptose e processos associados à cromatina que são frequentemente alterados na biologia das doenças. A função alterada de PIAS4/PIASy tem sido estudada no contexto da sinalização oncogênica, da regulação inflamatória e de fenótipos de manutenção do genoma relevantes para a tumorigênese e modelos de transformação celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PIASy (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PIAS4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PIAS4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PIAS4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PIASy.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PIAS4 para a investigação da sinalização de PIASy, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PIAS4 críticos para a função PIASy
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PIAS4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PIASy Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PIASy Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PIAS4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PIASy Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PIASy (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PIAS4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PIAS4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.