Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIASx (m): sc-421655
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PIASx Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PIASx, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PIASx Antibody (D-12): sc-166494
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIASx (m) | sc-421655 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Pias2 code PIASx, un membre de la famille des inhibiteurs protéiques des STAT activés (PIAS), qui agit comme ligase E3 de la SUMO et corégulateur transcriptionnel. PIASx module la transcription dépendante des signaux en influençant les voies STAT, SMAD et des récepteurs nucléaires, et peut modifier des complexes associés à la chromatine via la SUMOylation de protéines cibles. Par ces activités, PIASx contribue à la régulation de la signalisation immunitaire innée, des réponses aux cytokines, ainsi que des programmes de cycle cellulaire et de différenciation. La dérégulation de la SUMOylation médiée par PIASx et du contrôle transcriptionnel a été associée, dans des modèles mécanistiques de maladie, à une signalisation inflammatoire aberrante et à des réseaux transcriptionnels oncogènes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PIASx (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pias2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pias2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pias2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PIASx.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pias2 pour l'étude de la signalisation de PIASx, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pias2 essentiels à la fonction de PIASx
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pias2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PIASx plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PIASx plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pias2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PIASx plasmide HDR (m) et le PIASx (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pias2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pias2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.