Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
PI 3-kinase p110β Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400541
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PI 3-kinase p110β El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PI 3-kinase p110β, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PI 3-kinase p110β Anticuerpo (C-8): sc-376641
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PI 3-kinase p110β Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400541 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PIK3CB codifica la subunidad catalítica p110β de la fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K) de clase I, que fosforila PIP2 para generar PIP3 y propagar señales aguas abajo de AKT–mTOR y otros nodos efectores. La PI3K p110β desempeña un papel destacado en la señalización iniciada por receptores tirosina quinasa y por GPCR, integrando señales que regulan la proliferación, la supervivencia, el metabolismo, la dinámica del citoesqueleto y el tráfico vesicular. En células humanas, la actividad alterada de la vía PI3K se asocia con frecuencia a señalización oncogénica, mecanismos de resistencia a terapias y respuestas inmunitarias e inflamatorias aberrantes. La función de PIK3CB también es relevante para la señalización de insulina/IGF y los programas de motilidad celular, lo que la convierte en un nodo ampliamente estudiado en el mapeo de vías y la genómica funcional.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110β (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PIK3CB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PIK3CB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PIK3CB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PI 3-kinase p110β.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PIK3CB para la investigación de la señalización de PI 3-kinase p110β, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PIK3CB críticos para la función de PI 3-kinase p110β
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PIK3CB para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PI 3-kinase p110β CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PIK3CB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PI 3-kinase p110β (h) y el plásmido HDR PI 3-kinase p110β (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PIK3CB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PIK3CB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.